Cấy mô một số loại lan

Thảo luận trong 'Hoa Lan' bắt đầu bởi xxxbopy, 25/10/06.

  1. xxxbopy

    xxxbopy Well-Known Member

    Tham gia:
    13/2/06
    Bài viết:
    1,372
    Thích đã nhận:
    232
    Đến từ:
    Thủ đô
    Bài này do em sưu tầm được, các bác ghé qua, cho ý kiến nhé!:
    - Chồi nguyên vẹn được dùng để kiểm chứng. Chồi bị làm chấn thương bằng cách cắt bỏ 2/3 chồi theo mặt cắt song song với trục phát hoa và như thế mặt cắt sẽ nghiêng với hướng mọc một góc anpha
    - Chồi bị làm chấn thương bằng cách cắt chồi làm hai qua mặt cắt theo trục.
    Đâm dọc chồi bằng một kim nhọn từ đỉnh xuống gốc.
    [​IMG]
    + Điều kiện nuôi cấy:
    - Môi trường Murashige và Skoog (M+S).
    Môi trường Knudson C.
    Ph: 5,8.
    - Ánh sáng 5.O00 lm/m2
    Quang kỳ 14 giờ
    Nhiệt độ 210.C

    - Dụng cụ đựng môi trường là lọ thuốc nhỏ chứa 10ml
    Hai tuần lề sau các chồi nguyên vẹn phồng lên và phát triến thành tược, trong khi các chồi bị chấn thương đã tạo mô sẹo. Từ 6 - 8 tuần người ta có thể quan sát thấy các chồi bất định nhỏ màu xanh, trên mô sẹo. Kết quả cho thấy rằng mặt cất nghiêng 2/3 chồi và đâm dọc chồi được coi là phương pháp tốt nhất và môi trờng M + S + 2m/1NÂ là môi trường tốt nhất - Mặc dù phần lớn các chồi phát sinh bất định từ mô sẹo, vẫn có một ít phát sinh không bất định từ các chồi bên cồn lại trên mặc, chấn thương. Sau 10 tuần lễ khi các chồi bất định vừa đủ lớn thì không được lấy ra, biểu hiện lúc ấy là các lá hình thành; chồi đạt được nhiều dài 5 - 10mm và rễ bất đầu xuất hiện. Cây con được lấy ra trong điều kiện vô trùng, được trồng trên môi trường Knud son C và xử lý như cây con trồng hạt. Khi cây con được lấy ra, các chồi khác vẫn hình thành và phát triển. Tuy nhiên nếu để một số lượng quá nhiều trên một mất thì các chồi lớn cản trở sự phát triển các chồi nhỏ. Để đảm bảo các chồi phát triển liên tục ta cấy chuyền các khúc mắt lúc đầu tiên sang môi trường mới khi các chồi được lấy ra hoặc khi môi trường khô và cạn nhất dinh dưỡng.

    + Kết luận:
    Dây là phương pháp nhanh chóng và luân phiên để nhân giống hồ điệp. Nhờ chấn thương, chúng ta sẽ đạt được nhiều cây con hồ điệp hơn so với các khúc mắt bình thường chỉ cho một cây con duy nhất. Tiến trình này tương tự việc cấy mô phân sinh ở chỗ là có được cây con ngay qua sự phân hóa và sự thành lập mô sẹo do sự phản phân hóa tiếp theo sau, nhưng khác ở điều là, không dùng mô phân sinh ngọn mà là hồi bị chấn thương.

    Đặc tính di truyền mà các cây con nhận được một cách bất định từ mô sẹo không được xác định, Malnassy và Shimade đà chứng sinh rằng? có tính bất ổn về di truyền trong mô cấy mặc dù các loài để xác định không có liên hệ gần gũi với Phalaen.opsis.

    Kỳ Hoa Dị Thảo (Sưu tầm)
     
    Last edited by a moderator: 25/10/06
  2. xxxbopy

    xxxbopy Well-Known Member

    Tham gia:
    13/2/06
    Bài viết:
    1,372
    Thích đã nhận:
    232
    Đến từ:
    Thủ đô
    Cấy mô phân sinh ngọn và mô phân sinh bên của giống Cattleya
    [​IMG]
    Các chồi sinh dưỡng có chiều dài 1 - 8cm đều có thể dùng được, các chồi được cắt lìa khỏi giả hành và được khử trùng trong clorox 20%, khi tách ra khỏi chồi cũng phải khử trùng bề mặt chồi trong 5 - 10 phút bằng dung dịch trên.
    Phân sinh mô bên được tách ra bằng các đường như hình vẽ, sau khi đã tách 1 - 2 lá non.
    Phân sinh mô đỉnh được lấy ra bằng cách tiệp tục tách hết các lá còn lại chỉ chừa lại một lá duy nhất trên chồi, cắt 4 đường dọc như hình A và một đường nằm ngang, thể tích của mô cấy khoảng từ 1 -2 m2, phân sinh mô bên được lấy như hình B.
    Điều kiện nuôi cấy
    - Môi trường Vacin và Went + 25% nước dừa.
    - Môi trường Morel +10% nước dừa + 1 phần triệu ANA.
    - ph 5 - 5,2.
    - ánh sáng 1.000 - 1.800 lm/m2.
    - Nhiệt độ 230C + 10C.
    Flask chứa 5ml môi trường lỏng (hoặc 20ml môi của mô cấy, ta sẽ cắt ngang hoặc dọc khối mô này, nuôi tiếp tục trên máy lắc khoảng 2 tuần. Sẽ cấy chuyền plbs trở lại, nếu plbs để yên tĩnh sẽ phát triển thành cây với rễ thật tốt, trong thời gian từ 6 - 8 tuần.

    + Kết luận :
    Plbs chỉ hình thành trên các môi trường Vacin và Went hoặc Morel có thêm nước dừa.

    Kỳ Hoa Dị Thảo (Sưu tầm)
     
    Last edited by a moderator: 25/10/06
  3. xxxbopy

    xxxbopy Well-Known Member

    Tham gia:
    13/2/06
    Bài viết:
    1,372
    Thích đã nhận:
    232
    Đến từ:
    Thủ đô
    Thêm bài nữa, cũng lấy chung từ nguồn bên Kỳ hoa sang các bác ơi:
    Cấy mô nhân sinh giống Cymbidium trên môi trường đặc
    Việc cắt mô phân sinh được thực hiện dưới một kính lúp ở trong một phòng trống trải : Kích thước mô cấy khoảng 1mm2 Mô phân sinh được lấy ra bằng 4 vết cắt thẳng góc chung quanh mầm lá và một vết cắt ở ngay bên trái bằng một lỡi lam đã được khử trùng bằng cồn
    và rửa lại bằng nước cất vô trùng. Đặt mô cấy lên bề mặt môi trường đựng trong ống nghiệm, trong một tủ cấy vô trùng, tất cả các động tác được tiến hành trên ngọn đèn cồn. Cuối cùng dùng bông gòn thấm nước nhét chặt miệng ống nghiệm để tránh sự nhiễm nấm.
    [​IMG]
    + Điều kiện nuôi cấy :
    - Môi trờng Knudson C.
    - ph môi trường là 5,2.
    - ánh sáng 1.O00lm/m2.
    - Quang kỳ 14 giờ.
    - Nhiệt độ 21 0C.
    - ống nghiệm.
    + Quan sát và kết quả :

    Mô cấy không có gì biến đổi được 2 hoặc 3 tuần lễ, sau đó mô cấy bắt đầu to và trở nên xanh và thường cần 2 tháng mới có được các plbs, với các rễ giả dài đến vài milimét nếu mô cấy quá bé phải mất từ 3 - 4 tháng. Khi thấy lá đầu tiên dưới dạng một vảy nhỏ, lấy plbs ra, đặt trên một đia pê tri vô trùng, cất thành 4 hoặc 6 miếng ngay qua trục giữa. Cấy chuyền các mảnh cắt này trở lại môi trường Knudson C nhưng có pha thêm nước chiết thực vật không quá 10% thể tích môi trường. Mặt cắt lành lại rất nhanh và chỉ sau 1 tháng trở thành một plbs mới sẵn sàng được cắt.

    + Kết luận :
    - Mô cấy không được bé hơn 1mm2, vì như thế sự hình thành plbs 'rất chậm.
    Môi trường cấy chuyền có thêm chất chiết thực vật sẽ giúp plbs hình thành nhanh hơn môi trường không có chất chiết. Tuy nhiên không nên sử dụng quá 10% thể tích môi trường và không nên dùng ở lần cấy đầu tiên
     
    Last edited by a moderator: 25/10/06

Chia sẻ trang này